 |
 |
 |
 |
|
 |
 |
77
несколько раз. Эти последовательности расположены в так называемых нитронах – частях генов, не
несущих полезной информации. Состоят они из нуклеотидов, повторяющихся от 3 до 30 раз и
распределенных по всей длине ДНК. У человека можно найти одинаковую последовательность
нуклеотидов, повторенную 5 раз в одном месте, потом 15 раз в другом, потом 25 раз в третьем. У
другого субъекта эти последовательности будут состоять из другого числа нуклеотидов и займут другие
участки ДНК.
Создатель генотипоскопической экспертизы, английский ученый-биолог А. Джеффрис в 1983 г.
выявил наличие в молекулах ДНК этих участков, характерных для каждого индивидуума, и разработал
пути практического использования данного феномена в криминалистике. Он доказал, что у всех людей
разное число таких участков, именуемых мини-сателлитами ДНК. Различно и отношение их длин: у
некоторых много длинных и мало коротких, у других много средних и мало длинных. Наконец, внутри
каждой последовательности имеется разное число нуклеотидов. Поэтому набирается более чем
достаточное количество генетических элементов для создания метода идентификации человека по
строению его ДНК.
Мини-сателлит ДНК представляет ее мутацию (отклонение от нормы). В отличие от большинства
других мутаций, встречающихся сравнительно редко, мини-сателлит оказался присущим геномам всех
живых существ. В каждом человеческом геноме в среднем до двух десятков таких мутаций,
расположенных на разных хромосомах. В совокупности они образуют набор мини-сателлитов ДНК,
различающихся по длине и месту локализации. Вероятность того, чтобы два субъекта имели одинаковое
число мини-сателлитов, идентичное распределение их длин и абсолютно одинаковую их
последовательность, равна практически нулю. Исключение составляют однояйцевые близнецы, которые
генетически идентичны друг другу.
Методика генноидентификационного исследования состоит в следующем. Молекулы ДНК,
выделенные из каких-либо клеток человека (кровь, сперма, волосы, кусочки кожи и т.п.), распределяют
в четыре пробирки. В каждую пробирку добавляют так называемый рестрикционный фермент. Он
разрушает одно из четырех азотистых оснований, разрывая цепь ДНК там, где это основание находится.
В результате ДНК расщепляется на фрагменты, заключающие целые мини-сателлиты.
Затем осуществляется вторая операция – сортировка получившихся фрагментов по их размерам.
ДНК, обработанная ферментом, переносится из каждой пробирки на пластинку, покрытую гелем. Для
перемещения фрагментов ДНК через это желеобразное вещество применяется электрофорез – метод,
основанный на различии в подвижности частиц под воздействием электрического поля. Маленькие
фрагменты перемещаются быстрее, чем крупные. Мини-сателлиты выделяются с помощью
специальных «зондов» – сочетаний десяти нуклеотидов. «Зонды» радиоактивны, а потому засвечивают
светочувствительную пластинку и образуют на ней темные, разные по толщине и положению полосы в
соответствии с числом мини-сателлитов, фиксированных в том или ином месте. Расположение этих
полосок – электрофореграмма – соответствует порядку, в котором расположены основания в
первоначальной цепи ДНК. Общее число различающихся полос на электрофореграмме у двух
неродственных между собой людей – не менее 10.
Метод высокочувствителен. Анализ можно произвести на очень малом количестве биологического
материала – достаточно капельки крови или стержня одного волоса. Если имеющееся в распоряжении
эксперта количество ДНК слишком незначительно, чтобы сразу произвести исследование, (например,
всего одна волосяная «луковица»), то применяется множительный «аппарат» в виде специальных
ферментов, которые «репродуцируют» или амплифицируют (накапливают) ДНК. После амплификации
и клонирования становится возможным проведение необходимых генотипоскопических анализов.
У одного и того же человека во всех клетках любых его органов – сердца, легких, печени, крови,
мозга, кожи и др. – мини-сателлитные участки ДНК абсолютно одинаковы. Более того, человек со
временем стареет; возраст, болезни, жизненные невзгоды могут до неузнаваемости изменить его лицо,
фигуру. Однако каждая клетка его организма, начиная с периода внутриутробного развития и даже
после смерти, будет сохранять свой неизменный вид индивидуальных компонентов ДНК.
В некоторых случаях электрофореграммы ДНК могут оказаться единственным средством,
позволяющим идентифицировать личность. Наследственную информацию в клетках организма ни
стереть, ни изменить невозможно.
Однако биологические ткани, находящиеся вне организма, подвержены изменениям, а ДНК –
деградации вследствие гнилостных процессов. Поэтому обеспечение правильного хранения
биологических объектов имеет для генотипоскопической экспертизы очень важное значение. Такие